Skip to content

Czynnik wzrostu śródbłonka naczyniowego w płynie ocznym pacjentów z retinopatią cukrzycową i innymi zaburzeniami siatkówki ad

1 tydzień ago

532 words

Klasyfikacja aktywnej i spoczynkowej wewnątrzowokularowej neowaskularyzacji. Panel A pokazuje typową aktywną neowaskularyzację, jak zdefiniowano w sekcji Metody (stężenie VEGF w szklistce, 1,9 ng na mililitr). Występuje rozległa neowaskularyzacja siatkówki (czarne strzałki) powstające z głowy nerwu wzrokowego, krwotok do ciała szklistego (biała strzałka) i bliznowacenie z laserowej fotokoagulacji panetinalnej (strzałka). Panel B pokazuje spoczynkowe neowaskularyzację bez wykrywalnego szklistego stężenia VEGF. Istnieje wiele nieperfundowanych, gliotic pozostałości po naczyniach (strzałki). Dane kliniczne, w tym oznaczenia aktywności neowaskularnej oka, uzyskano od chirurga w czasie operacji z wystandaryzowanymi postaciami i gdy tylko było to możliwe, potwierdzono standardową fotografię dna oka. Neowaskularyzację uznawano za aktywną, jeśli występowały perfuzowane, wieloprzęsłowe irydowe lub preretalne naczynia włosowate (Figura 1A) i były nieaktywne, jeśli wcześniej udokumentowana aktywna proliferacja uległa całkowitemu cofnięciu lub jeśli obecne były tylko nieperfuzowane, glikozy naczynia lub zwłóknienie (Figura 1B).
Wyniki u pacjentów z neowaskularyzacją siatkówki porównano z wynikami u pacjentów z tymi samymi zaburzeniami, ale bez neowaskularyzacji siatkówki oraz u pacjentów, u których nie rozpoznano potencjalnie zaburzeń neowaskularyzacji. Dlatego z tej grupy wyłączono pacjentów z cukrzycą, rubeosis iridis, odwarstwieniem siatkówki, naczyniowymi błonami neowaskularnymi, retinopatią wcześniactwa, zamknięciem żyły środkowej siatkówki, zapaleniem błony naczyniowej oka i zapaleniem siatkówki. Wskazaniami do zabiegu w grupie kontrolnej były: zaćma, przewlekła jaskra z otwartym kątem przesączania, jaskra z recesją kątową i idiopatyczna błona epiretinalna.
Pobieranie próbki
Próbki płynu do oczu zbierano w jałowych probówkach (Thomas Scientific, Swedesboro, NJ), umieszczano natychmiast na lodzie, sklarowano przez odwirowanie przy 16000 xg przez pięć minut w 4 ° C i szybko zamrożono w -80 ° C. Próbki zostały wysłane pocztą nocną w suchym lodzie wraz z towarzyszącymi im danymi pacjenta do Centrum Diabetologicznego Joslin, gdzie zostały skatalogowane i oznaczone w anonimowy sposób. Próbki wysyłano następnie bez identyfikowania informacji klinicznej do Genentech w celu oznaczenia immunologicznego i wiązania receptora VEGF.
Test radioimmunologiczny
Stężenie VEGF w płynie oka mierzono za pomocą testu radioimmunometrycznego z dwoma przeciwciałami monoklonalnymi, które wiązały się z różnymi epitopami na VEGF165 i dłuższych izoformach24. Testy przeprowadzono na 96-studzienkowych płytkach immunologicznych (Immunlon-1, Dynatech, Chantilly, Va.); do każdej studzienki dodano 100 mikrolitrów roztworu zawierającego 10 .g przeciwciała monoklonalnego anty-VEGF 5F8 (podobnego do przeciwciała B2.6.224) na mililitr roztworu w 50-mM buforze węglanowym (pH 9,6) przez 16 godzin w temperaturze 4 ° C. Płytki przemyto trzy razy, blokowano przez jedną godzinę w 25 ° C za pomocą 300 mikrolitrów 0,5% albuminy surowicy bydlęcej i 0,03% Tween 80 w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (pH 7,4) na studzienkę i przemyto następnie 0,03% Tween 80 w buforowany fosforanem roztwór soli fizjologicznej (pH 7,4) przed dodaniem rozcieńczonych próbek płynu do oczu (w podwójnych pomiarach od trzech do sześciu seryjnych dwukrotnych rozcieńczeń) lub standardowych roztworów VEGF165 (zakres, 20 pg na mililitr do 50 ug na mililitr).
Płytki inkubowano przez dwie godziny w 25 ° C z delikatnym mieszaniem, supernatanty odrzucono, a studzienki przemyto
[patrz też: ześlizg kręgu, mięsień skośny wewnętrzny brzucha, terapia powięziowa ]

Dodaj komentarz

Twój adres email nie zostanie opublikowany. Pola, których wypełnienie jest wymagane, są oznaczone symbolem *

Powiązane tematy z artykułem: mięsień skośny wewnętrzny brzucha terapia powięziowa ześlizg kręgu